mu p75-SAP：一種用于消除小鼠中表達(dá)p75NTR的細(xì)胞的工具;通過(guò)NGFR親和純化的兔多克隆抗體靶向，通過(guò)皂苷消除。

低親和力神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（p75NTR） 抗體與沙孢菌素的偶聯(lián)產(chǎn)生了一種細(xì)胞毒素，可消除CBF神經(jīng)元，同時(shí)保留表達(dá)GAD、鈣結(jié)合素和小白蛋白的鄰近神經(jīng)元。mu p75-SAP消除了小鼠中表達(dá)p75NTR的細(xì)胞。膽堿能前腦神經(jīng)元的永久和選擇性去除是研究行為、神經(jīng)元丟失（例如阿爾茨海默?。?、其他系統(tǒng)響應(yīng)丟失的可塑性、替代療法以及藥物作用和依賴性的重要?jiǎng)游锬Ｐ汀?/p>

mu p75-SAP#IT-16是親和純化的兔多克隆抗體p75的化學(xué)偶聯(lián)物新臺(tái)幣和核糖體失活蛋白，皂苷。它特異性地消除了小鼠中的p75NTR陽(yáng)性細(xì)胞。

【資料圖】

mu p75-SAP可單獨(dú)提供（第#IT-16類）或作為kit（第#KIT-16類），其中包括mu p75-SAP和兔IgG-SAP（第#IT-35類）。

背景：靶向SAP偶聯(lián)物是該技術(shù)中使用的強(qiáng)大且特異的損傷劑稱為分子外科。核糖體失活蛋白saporin（來(lái)自植物種子，Saponaria officinalis）與靶向劑（細(xì)胞表面識(shí)別的任何物質(zhì)內(nèi)化）。將靶向綴合物施用于細(xì)胞（體外或體內(nèi)）。目標(biāo)代理人尋找并與其在細(xì)胞表面上的靶標(biāo)結(jié)合。偶聯(lián)物被內(nèi)化，saporin脫離靶向試劑，并使核糖體失活，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)抑制，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

不具有細(xì)胞表面標(biāo)記的細(xì)胞不受影響。低親和力神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體（p75NTR）抗體與saporin的偶聯(lián)產(chǎn)生了消除CBF神經(jīng)元的細(xì)胞毒素，同時(shí)保留表達(dá)GAD、鈣結(jié)合蛋白和細(xì)小白蛋白。μp75SAP消除小鼠中表達(dá)p75NTR的細(xì)胞。永久和選擇性移除膽堿能前腦神經(jīng)元是研究行為、神經(jīng)元損失（例如。阿爾茨海默?。?、其他系統(tǒng)對(duì)損失的可塑性、替代療法和藥物作用，以及依賴。

mu p75-SAP特異性和制備：

這種靶向毒素識(shí)別小鼠體內(nèi)攜帶p75NTR的細(xì)胞。μp75 SAP是親和純化的兔多克隆抗體p75NTR（Cat.#AB-N01AP）和核糖體失活蛋白，saporin（目錄#PR-01）。該產(chǎn)品通過(guò)細(xì)胞毒性試驗(yàn)進(jìn)行常規(guī)測(cè)試。

用途：

μp75SAP特異性消除p75NTR陽(yáng)性細(xì)胞。在布料工作稀釋度必須由最終用戶確定。如果這是一個(gè)新批次，您必須評(píng)估在開始完整的實(shí)驗(yàn)方案之前進(jìn)行適當(dāng)?shù)墓ぷ飨♂尅?/p>

儲(chǔ)存：使用前，在微型冰箱中輕輕旋轉(zhuǎn)材料5-10秒。將材料儲(chǔ)存在未稀釋的環(huán)境中

在–20°C下進(jìn)行1-2個(gè)月的等分試樣。為了長(zhǎng)期儲(chǔ)存，將材料儲(chǔ)存在–80°C的溫度下。材料應(yīng)為等分到方便的體積和數(shù)量，以避免重復(fù)冷凍和解凍，從而損壞蛋白質(zhì)含量。在這些條件下，該材料具有非常穩(wěn)定的保質(zhì)期。解凍應(yīng)在室溫或在冰上。解凍后的溶液在使用前應(yīng)保持在冰上。不要將還原劑（如二硫代蘇糖醇、β-巰基乙醇或抗壞血酸）與此材料一起使用。它會(huì)使毒素失活。

處理：高壓釜，或暴露在0.2 M NaOH中，這些物質(zhì)會(huì)接觸到毒素。

將NG6細(xì)胞以1000個(gè)細(xì)胞/孔接種并孵育過(guò)夜。皂苷、兔IgG SAP（Cat.IT-35）和μp75 SAP

（親和純化的兔多克隆與小鼠NGFr的綴合物和saporin）以10μl體積加入孵育72小時(shí)。添加PMS/MTS顯影試劑培養(yǎng)板1-2小時(shí)，然后在490nm下讀取。

文獻(xiàn)參考：

1. Moreau PH, Cosquer B, Jeltsch H, Cassel JC, Mathis C (2008) Neuroanatomical and behavioral

effects of a novel version of the cholinergic immunotoxin mu p75-saporin in mice.

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2. Ihunwo AO,Schliebs R (2007) BBeta-site amyloid precurosor protein cleaving enzyme

(BACE1) expression by astrocytes following p75-saporin immunolesion in transgenic TG2576

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3. Hunter CL, Quintero EM, Gilstrap L, Bhat NR, Granholm AC (2004) Minocycline protects

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4. Rossner S, Schliebs R, Bigl V (2000) Intracerebroventricular infusion of CHO5, a rat

monoclonal antibody directed against mouse low-affinity nerve growth factor receptor

(p75NTR), specifically labels basal forebrain cholinergic neurons in mouse brain. Metab Brain

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